Düzenleyici T hücreleri (Treg), immün toleransın efektör hücresel kolu olarak kabul edilir. Treg’e, Kojima’nın (1976) ilk yayınından bu yana hücresel özellikler ve tıbbi uygulamalara yönelik sürekli artan bir ilgi vardır. Treg’ler, benzersiz baskılayıcı fenotipleri ile birlikte, T hücreleri popülasyonuna olan ilişkilerini yansıtan geniş bir molekül yelpazesini ifade eder, ayrıca araştırma ve tıbbi uygulamalarda yaygın olarak uygulanır. Geleneksel T hücrelerine benzer şekilde, cd45ra, yeni timik göçmenler (cd31), aktive (hla-dr) vb. ekspresyonuna dayalı olarak naif ve hafıza olarak ayırt edilebilirler. Ayırt edici özelliği ise transkripsiyon faktörü foxp3’ün ifadesidir ve birkaç geni düzenleyerek Treg’lerin transkripsiyon programını kontrol ederken aynı zamanda ekspresyonunu artırır.
Foxp3 stat5 sinyal yolunun muhtemelen anahtar öneme sahip olduğu sıkı bir düzenlemeye tabidir. Bunun iki aşamalı bir süreç olduğu söylenebilir, çünkü cd25 hi’nin oluşturulmasıyla başlar, ancak foxp3 – Treg öncülleri, ardından hdac içeren sitokin / stat5’e bağlı sinyaller yoluyla foxp3’ün indüksiyonu gelir. JAK / stat yolunun bloke edilmesi, foxp3 ekspresyonunu düşürür. Ek olarak yapılan bir grup çalışma, Tregs baskılama fonksiyonunun sürdürülmesinin, foxp3 lokusunun polycomb baskılayıcı kompleks 2 (prc2) tarafından epigenetik düzenlenmesine bağlı olduğunu gösterir. PRC2 esas olarak zeste homolog 2 (EZH2), EED, SUZ12 ve RbAp48’in geliştirici olarak dört alt birimden oluşur, ayrıca burada EZH2 özel ilgi konusudur. EHZ2’nin işlevi, farklı T hücre popülasyonları arasında farklılık gösterir, H3K27me3 seviyelerinde ve susturulmuş genlerde değişikliklere yol açar. FoxP3 negatif hücrelerde EZH2 eksikliği, otoimmün hastalıklar, azalmış Treg sayısı ve hafıza T hücrelerinin genişlemesi ile ilişkilidir.
Treg’lerin çeperdeki kökeni hala sıcak bir konudur ve açık kanıtlar, Treg’lerin bir alt kümesinin – timik Treg’lerin (tTregs), T hücrelerinin intratimik olgunlaşma süreci sırasında doğrudan timustan geldiğini gösterir. Bunların seçimi, mTEC’ler ve timositler arasındaki yüksek aviditeli etkileşimlerle negatif seçim sırasında ağırlıklı olarak medullada meydana gelir, ancak bazı çalışmalar sürecin kortekste daha erken başladığını gösterir. Artan TGF-konsantrasyonu, hormonal değişiklikler veya sürekli antijenik stimülasyon gibi spesifik koşullar altında, Treg’ler periferdeki, indüklenebilir Treglerdeki (iTregs) naif CD4 + T hücrelerinden kaynaklanabilir.
Treg’ler Farklı Bastırıcı Mekanizmalarla Silahlandırılır
Kökeni ne olursa olsun, Treg’ler güçlü bir bağışıklık bastırıcıdır ve her iki alt küme de bağışıklık tepkisinin gücünü düzenlemek için çeşitli yaklaşımlar kullanır. Kısaca, belirli moleküllerin ekspresyonuna, sitokinlerin salgılanmasına ve IL-2 tüketimine dayanırlar, temasa bağlı ve temastan bağımsız olarak kategorize edilebilirler. İlk çalışmalar, temasa bağlı yolun Tregs tarafından CD152’nin (CTLA-4) konstitütif ekspresyonu ile gerçekleştiğini göstermiştir. CD80 ve CD86 yolağının bağlanması, triptofan katabolizmasını ve indolamin 2,3 dioksijenaz (IDO) ekspresyonunu aktive eder. Diğer bir mekanizma PD-1 / PD-L1’i içerir ve hem otoreaktif B hücrelerine hem de T lenfositlere karşı etkilidir.
Dilek ve ekibi alloreaktif insan T hücrelerini ve bloke edici antikorları kullanarak, canlı hücre dinamik mikroskobu ile kanıtlanan, CD28, CTLA-4 ve PD-L1’in, Treglere karşı aktive edilmiş Teff’te hızı, motiliteyi ve immün sinaps oluşumunu farklı şekilde kontrol ettiği kanıtlanmıştır. Doğal olmasına rağmen, Treglerin yüzeyindeki ekspresyonu indüklenebilir şekilde artmıştır ve hedef hücrelerde farklı reseptörlerin aracılık ettiği sinyalleme kaskadlarının negatif düzenlenmesini sağlar. Böylece, Treg’ler hücresel çoğalmayı ve aktivasyonu doğrudan zayıflatır. İkinci hat, aktivasyon üzerine farklı çözünür faktörlerin üretilmesiyle kolaylaştırılır ve bunlardan bazıları aşağıdaki gibidir:
• İmmünosupresif sitokinler,
• IL-10, TGF-b, IL-34 ve IL-35,
• Perforinler,
• Granzimler,
Treg’lerin proinflamatuar TNF-α gibi sitokinlerin hedefi olduğu da dikkate alınmalıdır. Kesin etkinin kesin olarak belirlenmesi gerekir çünkü mevcut veriler tartışmalıdır. Valencia ve ekibi, anti-TNF antikoru (infliksimab) ile tedavinin FOXP3 mRNA’yı ve CD4 + CD25 hi Treg’ler tarafından protein ekspresyonunu arttırdığını ve baskılayıcı fonksiyonlarını geri kazandığını kanıtlamıştır. Daha sonra Chen ve ekibi plakaya bağlı anti-CD3 Ab ve çözünür anti-CD28 Ab ile in vitro aktivasyon üzerine, yüksek oranda saflaştırılmış fare Treg’leri tarafından Foxp3 ekspresyonunun önemli ölçüde aşağı regüle edildiğini gösterir. TNF bu etkiyi kısmen ortadan kaldırır ve Foxp3 ekspresyonunu stabilize eder, çünkü TNF’nin bu etkisi anti-TNFR2 Ab tarafından bloke edilebilir, ancak anti-TNFR1 Ab tarafından bloke edilemez. Her durumda TNF-a’nın rolünün daha fazla araştırılması gerekir, çünkü TNF-a, Treg’lerin de dahil olmasının beklendiği iltihaplı reaksiyonlarda önemli bir rol oynar.
Etkinleştirmenin ardından, efektör T hücreleri, T hücrelerinin çoğalmasını ve bağışıklık tepkisinin genişlemesini uyaran IL-2 üretir. Aynı zamanda, Treg’ler yüksek CD25 ekspresyonu ile ayırt edilirler. Bu gerçekler, Treg’lerin hayatta kalmak için IL-2’ye ihtiyaç duyduğunu göstermektedir. Aktif hale getirilmiş bir ortama yerleştirilen Treg’ler, efektör hücrelerle rekabet edebilir ve sonuç olarak ortamdaki IL-2 seviyelerini düşürebilir. Aslında bu, Treg’lerin bir bastırma durumuna ulaşmak için uyguladığı üçüncü yaklaşımdır. Düzenleyici T hücreleri, bağışıklık toleranslı ortamın oluşturulması için yukarıda bahsedilen yaklaşımların tümünü uygular. Yine de nTregs veya iTregs tarafından tercih edilen mekanizma hakkında hiçbir kanıt yoktur. Benzer şekilde, veri bolluğuna rağmen, belirli bir patolojik duruma hiçbir spesifik mekanizma atfedilemez. Muhtemelen, Tregs’in çalışma şekli, T-hücresi reseptör-antijen tanıma ve etkileşiminin ince ayarına, hedef hücre özelliklerine ve çevreleyen ortamdaki sitokin spektrumuna bağlıdır.
Düzenleyici T Hücrelerinin Operasyonel Tolerans Üzerindeki Etkisi
Katı organ naklinden (SOT) sonra bağışıklık toleransının oluşturulması, ameliyat sonrası dönemde temel terapötik zorluktur. Çoğu durumda, immünosupresif tedavinin sürekli uygulanmasıyla indüklenir. Bununla birlikte, bazı hastalarda, enfeksiyonlar, kanser vb nedeniyle rejimin kesilmesi gelir. Şaşırtıcı bir şekilde, bazı durumlarda immünolojik parametrelerde, immün baskılama olmamasına rağmen bir immün tolerans durumunun geliştiğini gösteren değişiklikler bulunmuştur. Bu özel durum, operasyonel tolerans olarak tanımlanır ve terapisiz hastalarda herhangi bir klinik ve histolojik red belirtisinin olmaması ile karakterizedir. Operasyonel tolerans (OT), farklı katı organların transplantasyonundan sonra bildirilir, ancak LT’de sıktır. Karaciğer ve yerleşik lenfositlerin tolerojenik özelliklerinin bu süreçte anahtar rol oynadığı düşünülmektedir.
Kesin mekanizmalar tam olarak açıklığa kavuşturulmamıştır, ancak yoğun araştırmalar, bunun birden çok faktöre bağlı olduğunu vurgulamaktadır. Bunlar arasında düzenleyici T hücreleri, özel gen ekspresyon profili ve HLA-G’nin serum seviyeleri bulunur. Düzenleyici T hücreleri, OT ile ilişkili ilk parametredir ve spontan toleransı olan hastalarda, alıcının yaşından bağımsız olarak artar. Koshiba ve ekibinin çalışmasına göre, toleranslı hastaların periferik lenfositlerinde sadece CD4 + CD25high + T hücrelerinin oranı artmakla ve MLR’yi spesifik olarak donör antijenine bastırmakla kalmaz. Aynı zamanda FOXP3 eksprese eden hücreler de toleranslı karaciğerde mevcuttur. Pons ve ekibi, M16’ya kadar iki ayda bir değerlendirme aralıklarında operasyonel toleransı olan hastalarda CD4 + CD25 + ve CD4 + CD25 hi hücrelerinde sürekli artışı OT olmayan hastalara kıyasla açıklanmıştır.
İlginç bir şekilde, LT Tregs’de belirli bir dinamik gösterilir. İlk çalışmalardan birinde, Treg’lerin transplantasyon öncesi seviyeleri kontrollere göre hastalarda daha yüksektir. En düşük seviyeler Tx’den sonraki 3. ayda gözlenmiştir, ardından 12 ayda ve daha sonraki zaman noktalarında göreceli bir artış izlemiştir. Asıl soru, bu hücrelerin alıcılarda neden yükseldiğidir? Aslında literatürde bu konuyu tartışan raporlar şimdiye kadar yetersizdir. Demir kıran ve ekibinin ayrıntılı çalışması, insan karaciğer greftlerinin perfüzatlarında CD4 + CD25 + Foxp3 + Treg’lerin varlığını ve allosupresif aktivitesini incelemiştir. 
Bu incelemede karaciğer Tx’den sonra alıcıların dolaşımındaki hücrelerin varlığını izlemişlerdir. Araştırmacılar, sağlıklı kontrol kanı ile karşılaştırıldığında CD4 + CD25 + CTLA4 + T hücrelerinin oranının arttığını göstermektedir. CD127 için negatif olan Foxp3 + hücrelerinin artan yüzdeleri, perfüzatlarda Treg’lerin zenginleşmesini doğrulamıştır. Verici ve alıcı T hücrelerinin çoğalmasını ve IFN-üretimini baskılamışlardır. Tx’den sonraki ilk haftalarda in vivo olarak, alıcı kanındaki CD4 + CD25 + CTLA4 + T hücrelerinin % 5’ine kadar donör karaciğerinden elde edilmiştir. Önemli sayıda donör Treg’in perfüzyon sırasında karaciğer greftinden ayrıldığını ve Tx’ten sonra alıcıya göç etmeye devam ettiğini gösterir.
Bu donör Treg’ler, direkt yol allorespons’larını baskılar ve in vivo, karaciğer Tx’ten sonra erken dönemde kimerizm ile ilişkili toleransa katkıda bulunabilir. Yapılan bir çalışmada, 7. günde (D7) Treg yüzdesinde bir seçim bulunmuştur ve ardından D30, tanıdan veya yaştan bağımsız olarak her zaman sağlıklı kontrol değerleri civarında ve üzerinde olana kadar bir düşüş izlemiştir. Karaciğer fonksiyon laboratuvarı parametrelerinin eşzamanlı rutin ölçümü, Treg’lerdeki artışın albümin sentezi restorasyonundan önce geldiği belirlenmiştir. Başka bir çalışmada Baumann ve ekibi akut klinik rejeksiyona (ACR) kıyasla subklinik reddin (SCR) iyi huylu klinik seyrinin, daha az sitotoksik T hücresi ve daha fazla CD4 + FOXP3 + Treg gösteren intrahepatik T hücresi infiltrasyon paternleri ile ilişkili olduğuna dair kanıtlar elde etmişlerdir. SCR’li hastalarda infiltre T hücreleri modelinin daha güçlü bir CD4 + birikimi, artan bir CD4 + / CD8 + oranı ve artan bir CD4 + forkhead box P3 (FOXP3) + düzenleyici T hücresi (Treg) / CD8 + oranı ile karakterize olduğunu göstermektedir. Ayrıca bu intrahepatik T hücre paternleri periferik kana yansımamıştır. Kümülatif olarak bu veriler, karaciğer transplantasyonu ile ilişkili belirli bir tür hücresel kimerizm varlığını ortaya koymaktadır.
Kimerizm, bir bireyden diğerindeki hücrelerin varlığıyla karakterize edilen özel bir olgudur. Mikrokimerizm, hematopoietik kök hücre naklinde, yolcu lenfositlerinin greftten alıcıya ve gebelikte (fetüs) göçünün bir sonucu olarak bildirilmiştir. Ayrıca SOT’de mikrokimerizm ilk olarak farelerde tanımlanmıştır. Verici mononükleer hücrelerin alıcıdaki greftten göç ettiğini gösteren çok sayıda rapor arasında, Jonsson ve ekibi en yüksek kimerizm seviyelerinin transplantasyondan sonraki ilk 48 saat içinde olduğunu ve aralığın toplam periferik kan mononükleer hücrelerinin % 20’sine ulaştığını bulmuştur.
Kısa ve çok ilginç bir derlemede Abrol ve ekibi, karaciğerde artan kemokin ekspresyonunun, tolerans indüksiyonuna yönelik doğal olarak programlanmış çeşitli karaciğer hücreleriyle temasa geçerek sonradan yok edilen alloreaktif T hücrelerini çektiğini varsaymaktadır. Donöre özgü hipo-duyarlılık, T yardımcı tip I sitokinin (IFN-γ) aşağı regülasyonu ve T yardımcı tip 2 sitokininde (IL10) değişiklik olmamıştır. Laboratuvar ortamında operasyonel toleransa ulaşan alıcılarda karışık lenfosit reaksiyonu da bildirilmiştir. Aslında, bu konu, farklı hücresel alt kümelerin ayrıntılı değerlendirmesine yönelik daha fazla çalışmaya ihtiyaç duyar. Muhtemelen, Treg’ler yolcu lökositlerinin bir parçası olabilir veya modifiye edilmiş hepatik ortam tarafından ikincil olarak indüklenebilir.
Kaynakça:
ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3006675/
anaesthesiajournal.co.uk/ S1472-0299(20)30147-8/abstract
link.springer.com/pdf/10.1007%2F3-540-28977-1_35.pdf
aasldpubs.onlinelibrary.wiley.com/ pdfdirect/10.1002/hep.1840200543
Yazar: Özlem Güvenç Ağaoğlu